江苏股票配资 Cyanine2 NHS Ester(简称CY2-SE)反应原理_衍生物_标记_分子
Cyanine2 NHS Ester(简称CY2-SE)反应原理江苏股票配资
Cyanine2 NHS Ester(简称CY2-SE)是一种基于Cyanine2染料的活性酯衍生物,广泛用于生物分子标记和荧光成像领域。该试剂通过其活化的NHS酯基团(N-羟基琥珀酰亚胺酯)能高效地与生物分子上的游离氨基发生共价结合,形成稳定的酰胺键,实现对蛋白质、肽链、核酸以及其他含氨基的生物分子的荧光标记。
化学结构与性质
Cyanine2是一种具有共轭双键结构的荧光染料,表现出蓝绿色荧光,激发波长约为489 nm,发射波长约为506 nm。其良好的光学性质使其成为生物标记和成像的理想荧光团。Cyanine2 NHS Ester在染料分子末端引入了活性NHS酯基团,赋予其高反应活性,能够在温和条件下与游离氨基发生酰胺键形成反应。
反应原理
CY2-SE标记反应的核心是NHS酯基团与初级氨基的亲核加成反应。NHS酯是一种良好的活性酯,由N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与羧基活化形成,具有高反应性和选择性。具体反应过程包括以下几个步骤:
亲核攻击
展开剩余69%在碱性或中性缓冲环境(pH约7.0-9.0)中,生物分子上的初级氨基(-NH2)对NHS酯上的羰基碳原子发起亲核进攻,形成一个四面体中间体。
酰胺键形成
中间体迅速重排,释放NHS基团,生成稳定的酰胺键(–CONH–),将Cyanine2染料共价连接到生物分子上。
副反应控制
反应条件温和,有效避免非特异性结合及NHS酯的水解。若反应体系中存在水,NHS酯可能发生水解生成羧酸,降低反应效率。因此,通常反应时间控制在合理范围内,以最大限度保证标记效率。
反应优势
高效与特异性
NHS酯对初级氨基具有较高的亲核选择性,能够特异性地与蛋白质或多肽链上的赖氨酸残基或N端氨基发生共价连接,避免非特异性标记。
温和反应条件
反应通常在室温下、缓冲液环境中进行,不影响生物分子的结构和功能,适合敏感生物样品的标记。
稳定共价连接
形成的酰胺键具有高度稳定性,不易被水解或酶解,保证标记分子的持久性。
多样化应用
适用于蛋白质标记、荧光免疫分析、荧光原位杂交、细胞成像等多种生物技术和分析方法。
产品名称:Cyanine2 NHS Ester
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:齐岳生物
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